多肽是采用固相FMOC或BOC化学法在PEG-聚苯乙烯载体树脂上合成的。合成完成后,先去除侧链保护基团,同时从树脂上切割多肽。随后,将经切割和去保护的多肽材料沉淀、清洗并溶解在含H2O/ACN/HOAC的缓冲液中,然后进行冻干处理。
多肽QC主要由ESI质谱法(确定全长产物)和反相高效液相色谱法(RP-HPLC;测定多肽纯度)来测定。不符合纯度要求的多肽则通过RP-HPLC法进行纯化。
图 1.固相FMOC
多肽稳定性取决于氨基酸组成和序列。冻干多肽通常比溶液形式更稳定。将多肽以冻干形式保存在-20oC或-80oC可最大程度减少降解。应尽量避免暴露于pH>8的环境或接触氧气。以下是多肽的可能降解途径。
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