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  • Electrical Retrieval of Living Microorganisms from Cryopreserved Marine Sponges Using a Potential-Controlled Electrode.

Electrical Retrieval of Living Microorganisms from Cryopreserved Marine Sponges Using a Potential-Controlled Electrode.

Marine biotechnology (New York, N.Y.) (2015-08-06)
Sumihiro Koyama, Shinro Nishi, Maki Tokuda, Moeka Uemura, Yoichi Ishikawa, Takeshi Seya, Seinen Chow, Yuji Ise, Yuji Hatada, Yoshihiro Fujiwara, Taishi Tsubouchi
摘要

The purpose of this study was to develop a novel electrical retrieval method (ER method) for living sponge-associated microorganisms from marine sponges frozen at -80 °C. A -0.3-V vs. Ag/AgCl constant potential applied for 2 h at 9 °C induced the attachment of the sponge-associated microorganisms to an indium tin oxide/glass (ITO) or a gallium-doped zinc oxide/glass (GZO) working electrode. The electrically attached microorganisms from homogenized Spirastrella insignis tissues had intact cell membranes and showed intracellular dehydrogenase activity. Dead microorganisms were not attracted to the electrode when the homogenized tissues were autoclaved for 15 min at 121 °C before use. The electrically attached microorganisms included cultivable microorganisms retrieved after detachment from the electrode by application of a 9-MHz sine-wave potential. Using the ER method, we obtained 32 phyla and 72 classes of bacteria and 3 archaea of Crenarchaeota thermoprotei, Marine Group I, and Thaumarchaeota incertae sedis from marine sponges S. insignis and Callyspongia confoederata. Employment of the ER method for extraction and purification of the living microorganisms holds potential of single-cell cultivation for genome, transcriptome, proteome, and metabolome analyses of bioactive compounds producing sponge-associated microorganisms.

材料
Product Number
品牌
产品描述

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D -(+)-葡萄糖, powder, BioReagent, suitable for cell culture, suitable for insect cell culture, suitable for plant cell culture, ≥99.5%
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纯乙醇, 200 proof, anhydrous, ≥99.5%
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氯化钠, Molecular Biology, DNase, RNase, and protease, none detected, ≥99% (titration)
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氯化钠 溶液, 5 M in H2O, BioReagent, Molecular Biology, suitable for cell culture
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氯化钠, BioXtra, ≥99.5% (AT)
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氯化钠, BioReagent, suitable for cell culture, suitable for insect cell culture, suitable for plant cell culture, ≥99%
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氯化钠 溶液, 0.9% in water, BioXtra, suitable for cell culture
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葡萄糖, 97.5-102.0% anhydrous basis, meets EP, BP, JP, USP testing specifications
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纯乙醇, 190 proof, ACS spectrophotometric grade, 95.0%
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D -(+)-半乳糖, ≥99% (HPLC), BioReagent, suitable for cell culture, suitable for insect cell culture
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D -(+)-葡萄糖, ≥99.5% (GC), BioXtra
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氯化钠 溶液, 5 M
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SAFC
氯化钠 溶液, 5 M
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蔗糖, ACS reagent
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D -(+)-半乳糖, ≥99% (HPLC)
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D -(+)-葡萄糖, BioUltra, anhydrous, ≥99.5% (sum of enantiomers, HPLC)
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硫酸镁, BioReagent, suitable for cell culture, suitable for insect cell culture
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纯乙醇, 190 proof, meets USP testing specifications
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氯化钠, BioUltra, Molecular Biology, ≥99.5% (AT)
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氯化钠, meets analytical specification of Ph. Eur., BP, USP, 99.0-100.5%
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氯化钠 溶液, BioUltra, Molecular Biology, ~5 M in H2O
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氯化钠, 99.999% trace metals basis
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硫酸镁 溶液, Molecular Biology, 1.00 M±0.04 M
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蔗糖, puriss., meets analytical specification of Ph. Eur., BP, NF
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硫酸镁 溶液, BioUltra, Molecular Biology
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D -(+)-葡萄糖, suitable for mouse embryo cell culture, ≥99.5% (GC)
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硫酸镁, ≥99.99% trace metals basis
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氯化钠 溶液, 0.85%
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