双标记探针
双标记探针是 qPCR 最常见的探针类型。它们是线性水解探针,用于 5' 核酸酶检测,分别在 3' 端、内部位置(碱基 9 和 10 之间)、内部位置(碱基 9 和 10 之间)和 3' 端带有 5' 报告染料和淬灭剂,或在 3' 端带有与 EDQ 连接的 MGB。
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Applications of Dual-Labeled Probes
- 微阵列验证
- 多个目标基因/少量样本
- 病原体检测多重分析
- 病毒载量定量
- 基因表达分析
- 基因拷贝测定
非常适合验证 MISSION® siRNA 和 shRNA 敲除。
使用双标记探针的好处> 使用双标记探针的好处
- 序列特异性设计简单
- 可提供广泛的报告基因/淬灭子组合
- 提高灵敏度
在您的探针中添加锁定核酸或 MGB:EDQ 至您的探针
使用 BHQ™ 锁定核酸的好处
- 增加热稳定性和杂交特异性
- 具有更好的热稳定性和杂交特异性
- 具有更好的热稳定性和杂交特异性
- 在 SNP 检测、等位基因鉴别和 体外 定量或检测方面具有更高的准确性
- 没有本征荧光(发光而不是发热),因此背景荧光更低
- 提高了信噪比,提供了更高的灵敏度
- 为多路复用提供了更广泛的报告选择
MGB的优点:EDQ
- 提高了探针与目标杂交的特异性,降低了非特异性结合的可能性
- 更高的灵敏度可使用更短的探针,从而提高 qPCR 检测的灵敏度
- 熔融温度调节允许对探针的 Tm 值进行调节,这有利于设计具有最佳 Tm 值的 qPCR 探针
- 降低背景信号有助于减少背景荧光,从而提高 S:N 或信噪比
- 增强的稳定性可提高探针-目标杂交的稳定性,降低探针降解的可能性
- 设计灵活性扩大了探针设计的选择范围,有助于创建高效的 qPCR 检测
- 通过错配识别增强 SNP 检测
双标记探针的工作原理
双标记探针是用两种不同染料标记的单链寡核苷酸。报告染料位于 5' 端,淬灭分子位于 3' 端。淬灭剂分子通过荧光共振能量转移(FRET)抑制报告染料的自然荧光发射。下图描述了这一机制。

1JOE/TET 替代品
2VIC® alternative
3Cyanine 3替代品
4TAMRA™ 替代品
5Cyanine 5替代品
5Cyanine 5替代品
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