酵母因能够快速生长并具有分散的细胞而被认为是用于真核生物研究的模范系统。此外,可以相对容易地完成酵母细胞的复制铺板和突变分离,并且它们也具有明确的遗传系统。最为重要的是,酵母具有高度多功能的DNA转化系统,可有效用于蛋白质的生产。
酵母通常在YPD培养基中生长。YPD中的“Y”指酵母提取物,含有酵母强制自消化时产生的水溶性化合物。“P”指蛋白胨,是用蛋白酶消化动物蛋白而制备的肽和氨基酸混合物。“D”指右旋糖或葡萄糖,是酵母的碳源。YPD含有必需的营养成分,可以满足细胞的代谢需求。然而,某些培养基需要指定成分,为了满足应用需求,多种合成培养基应运而生。合成培养基可根据实验需要调整不同成分。
下面给出的实验方案可用于在液体和固体培养基中生长和维持酵母。
注意:在大约24小时后可以观察到单个酵母菌落,但在其可用于复制接种之前,需要孵育48小时以上。在使用合成的营养缺陷型培养基补剂的情况下,酵母培养物的生长速率约慢50%。
使用上述方法培养的酵母细胞可以在甘油中在-70 °C下冷冻保存3年以上,或在营养丰富的斜面培养基中在4 °C下保存6个月至一年。含有酵母细胞的YPD板用Parafilm®密封后也可以在4 °C下保存2-3个月。保存和复苏酵母细胞的实验方案如下:
注意:酵母细胞在8%(v / v)二甲基亚砜(DMSO,货号D8418)中的储存方法类似。
注意:避免解冻原液。如果原液解冻,则需要充分涡旋再重新冷冻。
酵母通常在30 °C下在YPD或合成培养基中生长。我们可专门针对您的应用,提供粉末和液体形式的生长培养基和补充剂。
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