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病毒载体下游工艺流程

病毒载体的纯化工艺传统上一直都是基于生产单克隆抗体(mAb)的系统,并非为提供必要的回收率而专门设计。

引入专为基因疗法病毒载体下游工艺而设计的新技术为提高产量和生产能力创造了机会。可利用以下方法来优化病毒载体下游工艺:

  • 超滤/洗滤 操作,特别是使用切向流过滤(TFF)进行细胞或病毒的收获和纯化、下游蛋白的浓缩和洗滤以及最终制剂
  • 强化 层析 工艺流程,通过高效、一次性层析膜吸附器等技术减少单元操作的数量和规模

这些下游技术可将病毒纯化时间从数小时缩短至数分钟,同时提高产品回收率,此外,这些技术还使扩展更容易,减少过程的碳足迹,实现设施的高效利用。


相关技术资源

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一级澄清

含病毒载体的原始培养基经过深层过滤或者离心与深层组合过滤,以去除大分子杂质和其他污染物。

二级澄清

经过一级澄清过滤的培养基采取额外步骤进一步纯化。

超滤/洗滤

超滤和洗滤分别用于产品浓缩和缓冲液交换。使用基于尺寸的过滤方法将病毒载体从杂质中分离。洗滤是将盐分和其他大分子杂质去除,代之以所选的缓冲液。

色谱

至少有两种层析方法被用于纯化病毒载体,包括离子交换、亲和与分子排阻层析。

病毒过滤

使用15纳米孔径的纳米过滤器对经过纯化的病毒载体进一步过滤,以去除外源病毒、内毒素及其他残余杂质和聚集体。

无菌过滤

在此过程中,可以多次进行无菌过滤或生物负荷降低。料液流经一个0.4或0.2微米的灭菌级过滤器,以去除细菌和其他加工过程中引入的微生物。

制成品灌装

将经过纯化和灭菌的病毒载体装入最终的预定容器。这里需要对试剂、包装材料和存储条件等方面考虑周全,确保产品的稳定性和完整性。


工作流程

基因治疗制造

基因治疗制造

基因疗法的兴起正在推动快速创新,但生产商在推出新疗法时却困难重重

病毒载体上游工艺流程

正确的上游工艺决策不仅影响病毒载体滴度,还影响下游工艺、时间线和监管认可

病毒载体制剂和制成品灌装

配制商业可行的基因治疗制剂需具备高水平的应用和监管专业知识

病毒载体特性和生物安全性检测

针对病毒载体产品开展必要的生物安全性检验和鉴定,有助于全面分析产品的质量属性:成分、效价、安全性和稳定性

病毒载体合同开发和生产

CDMO合作关系在推进临床管线及成功商业化方面发挥着关键作用




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